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    飛凈 Phygene 10×快速轉膜液(Rapid Transfer buffer)

    所屬目錄:生化試劑

    搜索關鍵字:飛凈 Phygene 10×快速轉膜液(Rapid Transfer buffer)

    信息簡介:飛凈 Phygene 10×快速轉膜液(Rapid Transfer buffer)

    詳細信息:
    “飛凈 Phygene 10×快速轉膜液(Rapid Transfer buffer)”參數說明
    是否有現貨: 認證: 飛凈 Phygene
    級別: 超純、高純 用途: 實驗室
    含量: 標準品 應用: 科學研究
    型號: PH0403 規格: 500ml
    商標: 飛凈 Phygene 包裝:
    產量: 3124
    “飛凈 Phygene 10×快速轉膜液(Rapid Transfer buffer)”詳細介紹
    產品簡介:

    >>快速轉膜液使用獨特配方,能高效快速地將蛋白轉移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。使用濕轉法(Tank blot)或半干轉法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分鐘內完成轉膜過程。

    >>快速和環保:快速轉膜液不使用甲醇,減輕了對實驗者和環境的傷害。

    >>兼容性好:快速轉膜液能兼容Laemmli膠,預制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。

    >>轉移效率高:快速轉膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉移效率,有效解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時轉移的問題。
    使用說明:

    轉膜前的準備:

    5-6張裁好的濾紙;裁好的轉印膜;足夠的1×快速轉移buffer

    一 濕轉法(Tank blot):

    1 按照下表配制1×快速轉膜液

    —— 1×快速轉膜液配制量
    100?ml 500?ml 1000?ml
    10×快速轉膜液 10?ml 50?ml 100?ml
    無水乙醇 20?ml 100?ml 200?ml
    超純水 70?ml 350?ml 700?ml

    2 將濾紙和海綿浸泡在1×快速轉膜液中,完全浸濕。

    3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉膜液中。

    注意:水中漂洗時間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉移。

    4 按照以下順序做好轉印三明治結構:

    負極(陰極)

    一塊海綿

    2mm濾紙

    凝膠

    轉印膜

    1mm濾紙

    一塊海綿(根據三明治的厚度選擇是否使用)

    正極(陽極)

    注意:?= 1 \* GB3 ① 要徹底清除三明治結構中的氣泡,適當補加1×快速轉膜液保持三明治結構濕潤。

    = 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。

    = 3 \* GB3 ③ 三明治結構的制作不能太緊,也不能太松。太緊和太松都會影響轉印效果。如果太緊的話,可以去除陽極一側的海綿或濾紙。

    5 將三明治結構放于轉移槽中。

    注:轉移槽中可以不用1×快速轉膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)電泳緩沖液取代。三明治結構中的快速轉膜液足夠保證轉膜的完成。

    二 半干轉(Semi-dry blot):

    1 按照下表配制1×快速轉膜液:

    —— 1×快速轉膜液配制量
    100?ml 500?ml 1000?ml
    10×快速轉膜液 10?ml 50?ml 100?ml
    無水乙醇 20?ml 100?ml 200?ml
    超純水 70?ml 350?ml 700?ml

    將濾紙浸泡在1×快速轉膜液中,完全浸濕。

    3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉膜液中。

    注意:水中漂洗時間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉移。

    4 按照以下順序做好轉印三明治結構:

    負極(陰極)

    下層濾紙

    凝膠

    轉印膜

    上層濾紙

    正極(陽極)

    半干轉時,濾紙、膠、膜之間的大小,一般是下層濾紙>=膜>=膠>=上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸;濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。

    注意:PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。

    三 轉移條件:

    推薦使用恒流轉移

    電流 轉移時間
    300?mA 30?to?35?min
    330?mA 25?to?30?min
    350?mA 25?to?30?min
    375?mA 20?to?25?min
    400?mA 15?to?20?min
    注意事項:
    為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

    我們所提供的產品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途!

    信息編輯:宜賓飛凈生物科技有限公司   字號:
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